
專業(yè)供應(yīng)單項(xiàng)壓力封閉劑
單向壓力封閉劑是否必要,取決于Elisa的模式及具體的實(shí)驗(yàn)條件。并非所有的Elisa固相均需單向壓力封閉劑,單向壓力封閉劑不當(dāng)反而會(huì)使陰性本底增高。一般說來,雙抗體夾心法,只要酶標(biāo)記物是高活性的,操作時(shí)洗滌徹底,不經(jīng)單向壓力封閉劑也可得到滿意的結(jié)果。特別是用單抗腹水直接包被時(shí),因其中大量非抗體蛋白在包被時(shí)同樣也吸附在固相表面,業(yè)已起到了類似單向壓力封閉劑劑的作用。但在間接法測定中,單向壓力封閉劑一般是不可少的。包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或錫袋中,在低溫可保存數(shù)月。1.2酶聯(lián)物(結(jié)合物)
結(jié)合物即酶標(biāo)記的抗體(或抗原),是ELISA中最關(guān)鍵的試劑。良好的結(jié)合物應(yīng)該是既保有酶的催化活性,也保持了抗體(或抗原)的免疫活性。結(jié)合物中酶與抗體(或抗原)之間有恰當(dāng)?shù)姆肿颖壤诮Y(jié)合試劑中應(yīng)盡量不含有或少含有游離的(未結(jié)合的)酶或游離的抗體(或抗原)。此外,結(jié)合物尚要有良好的穩(wěn)定性。
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鉆井液用單項(xiàng)壓力封閉劑(blocking)是繼包被之后用高濃度的無關(guān)蛋白質(zhì)溶液再包被的過程??乖蚩贵w包被時(shí)所用的濃度較低,吸收后固相載體表面尚有未被占據(jù)的空隙,鉆井液用單項(xiàng)壓力封閉劑就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙,從而排斥在Elisa其后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。單向壓力封閉劑的手續(xù)與包被相類似。最常用的單向壓力封閉劑劑是0.05%-0.5%的牛血清白蛋白,也有用10%的小牛血清或1%明膠作為單向壓力封閉劑劑的。脫脂奶粉也是一種良好的單向壓力封閉劑劑,其最大的特點(diǎn)是價(jià)廉,可以高濃度使用(5%)。高質(zhì)量的速溶食用低脂奶粉即可直接當(dāng)作單向壓力封閉劑劑使用,但由于奶粉的成份復(fù)雜,而且單向壓力封閉劑后的載體不易長期保存,因此在試劑盒的制備中較少應(yīng)用。
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