供應(yīng)牛β羥丁酸(βOHB)ELISA Kit
本試劑盒僅供體外研究使用、不用于臨床診斷!
預(yù)期應(yīng)用
ELISA 法定量測定牛血清、血漿或其它相關(guān)生物液體中βOHB 含量。
實驗原理
用純化的βOHB 抗體包被微孔板，制成固相載體，往微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的βOHB抗體、HRP標記的親和素，經(jīng)過徹底洗滌后用底物(TMB)顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的βOHB 呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
試劑盒組成及試劑配制
1、酶標板：一塊（96 孔）
2、標準品（凍干品）： 2 瓶，請臨用前15 分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為10 umol/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成10 umol/L，5 umol/L，
2.5 umol/L，1.25 umol/L，0.625 umol/L，0.312 umol/L，0.156 umol/L，樣品稀釋液直接作為空白孔0 umol/L。如配制5 umol/L 標準品：取0.5ml （不要少于0.5ml ）10umol/L 的上述標準品加入含有0.5ml 樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、樣品稀釋液：1×20ml。
4、檢測稀釋液 A：1×10ml。
5、檢測稀釋液 B：1×10ml。
6、檢測溶液 A：1×120 ul/瓶（1:100）。臨用前以檢測稀釋液A 1:100 稀釋（如：10ul 檢測溶液A / 990 檢測稀釋液A），充分混勻，稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制（100 /孔），實際配制時應(yīng)多配制 0.1-0.2ml。
7、檢測溶液 B：1×120 ul/瓶（1:100）。臨用前以檢測稀釋液B 1:100 稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8、底物溶液：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25 倍。
10、終止液：1×10ml/瓶（2 mol/L H2SO4）。
11、覆膜：5 張
12、使用說明書：1 份
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