供應(yīng)大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)ELISA Ki
本試劑盒僅供體外研究使用、不用于臨床診斷!
預(yù)期應(yīng)用
ELISA 法定量測定大鼠血清、血漿或其它相關(guān)生物液體中SP-D 含量。
實驗原理
用純化的 SP-D抗體包被微孔板，制成固相載體，往微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的SP-D抗體、HRP標記的親和素，經(jīng)過徹底洗滌后用底物(TMB)顯色。TMB 在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的SP-D呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
試劑盒組成及試劑配制
1、酶標板：一塊（96 孔）
2、標準品（凍干品）： 2 瓶，請臨用前15 分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后室溫靜置大約10 分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為40 ng/ml，將其稀釋為10 ng/ml 后，再做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成10 ng/ml，5 ng/ml，2.5 ng/ml，1.25 ng/ml，0.625 ng/ml，0.312 ng/ml，0.156 ng/ml，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 ng/ml。如配制5 ng/ml 標準品：取0.5ml （不要少于0.5ml ）10 ng/ml 的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、樣品稀釋液：1×20ml。
4、檢測稀釋液 A：1×10ml。
5、檢測稀釋液 B：1×10ml。
6、檢測溶液 A：1×120 ul/瓶（1:100）。臨用前以檢測稀釋液A 1:100 稀釋（如：10 ul檢測溶液A / 990 檢測稀釋液A），充分混勻，稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制（100 /孔），實際配制時應(yīng)多配制 0.1-0.2ml。
7、檢測溶液 B：1×120 ul/瓶（1:100）。臨用前以檢測稀釋液B 1:100 稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8、底物溶液：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25 倍。
10、終止液：1×10ml/瓶（2 mol/L H2SO4）。
11、覆膜：5 張
12、使用說明書：1 份
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