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供應(yīng)人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)ELISA試劑盒
本試劑盒僅供體外研究使用、不用于臨床診斷!
預(yù)期應(yīng)用
ELISA 法定量測定人血清、血漿或其它相關(guān)生物液體中CCK-8 含量。
實(shí)驗(yàn)原理
用純化的 CCK-8 抗體包被微孔板，制成固相載體，往微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的CCK-8 抗體、HRP 標(biāo)記的親和素，經(jīng)過徹底洗滌后用底物(TMB)顯色。TMB 在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的CCK-8
呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（ 值），計(jì)算樣品濃度。
試劑盒組成及試劑配制
1、酶標(biāo)板：一塊（96 孔）
2、標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2 瓶，請臨用前15 分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10 分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為50 pmol/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成50 pmol/L，25 pmol/L，
12.5 pmol/L，6.25 pmol/L，3.12 pmol/L，1.56 pmol/L，0.78 pmol/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 pmol/L。如配制25 pmol/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）50 pmol/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml 樣品稀釋液的Eppendorf 管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、樣品稀釋液：1×20ml。
4、檢測稀釋液 A：1×10ml。
5、檢測稀釋液 B：1×10ml。
6、檢測溶液 A：1×120ul /瓶（1:100）。臨用前以檢測稀釋液A 1:100 稀釋（如：10 ul檢測溶液A / 990 檢測稀釋液A），充分混勻，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（100 /孔），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制 0.1-0.2ml。
7、檢測溶液 B：1×120 ul/瓶（1:100）。臨用前以檢測稀釋液B 1:100 稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8、底物溶液：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25 倍。
10、終止液：1×10ml/瓶（2 mol/L H2SO4）。
11、覆膜：5 張
12、使用說明書：1 份
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