供應人血清白蛋白(HSA)ELISA Kit
本試劑盒僅供體外研究使用!
預期應用
ELISA法定量測定人血清、血漿或其它相關生物液體中HSA含量。
實驗原理
本試劑盒應用競爭抑制酶標免疫分析法測定標本中待測物質水平。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被抗體的微孔中同時加入酶標的抗原和待測抗原，被測抗原與酶標記抗原對特異性抗體進行競爭結合。經過徹底洗滌后用底物TMB 顯色。TMB 在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。待測標本濃度越高，標記抗原和抗體的結合就越受到抑制，顯色愈淺。顯色的深淺與酶量呈正相關，而與樣品中待測物質含量呈負相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯板：一塊（96孔）
2. 標準品：2 瓶，每瓶臨用前以0.8 ml 樣品稀釋液稀釋，蓋好后靜置10 分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為100 ug/mL，做系列倍比稀釋(注：不要直接在板中進行倍比稀釋)后，分別稀釋成100 ug/mL，33.3 ug/mL，11.1 ug/mL，3.7 ug/mL，1.23 ug/mL，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ug/mL，臨用前15分鐘內配制。如配制33.3 ug/mL標準品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ug/mL 的上述標準品加入含有1 ml 樣品稀釋液的Eppendorf 管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液：1×20ml/瓶。
4. 檢測溶液 A：2×120ul/瓶（1：100）臨用前以檢測稀釋液A 1：100稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔50ul），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如1ul檢測溶液A加99ul 檢測稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。
5. 檢測稀釋液 A：2×10ml/瓶。
6. 底物溶液：1×10ml/瓶。
7. 濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
8. 終止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
9. 覆膜：1×5 張
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